摘要：《Vaccine》的一篇報道中，實驗人員使用低壓手持式基因槍GDS-80，通過50psi的壓力，對小鼠投遞E7、NCRT、NCRT/E7、PCRT/E7、CCRT/E7或CRT/E7 DNA包被的金顆粒，結(jié)果表明，與野生型E7相比，NCRT與E7融合可增強E7特異性抗體應(yīng)答，NCRT/E7 DNA疫苗產(chǎn)生的E7特異性抗體效價與CRT/E7 DNA疫苗相當(dāng)。

　　抗原特異性腫瘤免疫治療和抗血管生成是癌癥治療的可行策略，因為它們可以在體內(nèi)多個部位治療全身腫瘤，同時鑒別腫瘤細胞和非腫瘤細胞。之前的研究中，實驗人員已經(jīng)開發(fā)出一種編碼鈣網(wǎng)蛋白(CRT)的DNA疫苗，該疫苗與人類有聯(lián)系本疫苗對接種小鼠產(chǎn)生較強的E7特異性抗腫瘤免疫和抗血管生成作用。

　　在《Vaccine》的一篇報道中，研究人員通過構(gòu)建與HPV-16e7抗原相關(guān)的CRT(N，P，C)三個域的DNA疫苗，對CRT的結(jié)構(gòu)域進行了表征，以產(chǎn)生E7特異性抗腫瘤免疫和抗血管生成效應(yīng)。

　　實驗中，研究人員發(fā)現(xiàn)C57BL/6小鼠皮膚內(nèi)接種編碼CRT(NCRT)N區(qū)(NCRT)的DNA，即CRT(PCRT)的P區(qū)，與E7相關(guān)的CRT(CCRT)C區(qū)與野生型E7-DNA免疫小鼠相比，其特異性CD8+T細胞前體明顯增加，對E7表達腫瘤的抗腫瘤作用顯著。

　　此外，CRT的N區(qū)還顯示出抗血管生成的特性，可能是NCRT/E7抗腫瘤作用的重要因素。因此，CRT的N域可以與DNA疫苗中的腫瘤抗原連接，從而產(chǎn)生抗原特異性免疫和抗血管生成效應(yīng)。

　　之前的研究里，實驗人員已經(jīng)將腫瘤特異性免疫和抗血管生成結(jié)合在一種創(chuàng)新的DNA疫苗策略中，該策略編碼與模型抗原HPV-16 E7相關(guān)的鈣網(wǎng)蛋白。近年來，全長鈣網(wǎng)蛋白被認為是一種內(nèi)皮細胞抑制劑，在體內(nèi)通過抗血管生成發(fā)揮抗腫瘤作用。因此，與腫瘤抗原嵌合連接的編碼NCRT的DNA疫苗代表了另一種結(jié)合免疫和抗血管生成方法產(chǎn)生有效抗腫瘤作用的有效方法。

　　實驗中，實驗人員使用低壓手持式基因槍GDS-80，通過50psi的壓力，對小鼠投遞E7、NCRT、NCRT/E7、PCRT/E7、CCRT/E7或CRT/E7 DNA包被的金顆粒，結(jié)果表明，與野生型E7相比，NCRT與E7融合可增強E7特異性抗體應(yīng)答，NCRT/E7 DNA疫苗產(chǎn)生的E7特異性抗體效價與CRT/E7 DNA疫苗相當(dāng)。

　　實驗數(shù)據(jù)表明，接種CRT/E7的裸鼠能夠產(chǎn)生E7特異性抗體應(yīng)答，提示鈣網(wǎng)蛋白介導(dǎo)的抗體應(yīng)答可能是由T細胞非依賴性機制引起的。NCRT是鈣網(wǎng)蛋白的N末端結(jié)構(gòu)域，在體內(nèi)已被證實能抑制內(nèi)皮細胞對bFGF或VEGF的增殖和血管生成。

　　通過抑制內(nèi)皮細胞的生長，NCRT可能會減少腫瘤新生血管，從而抑制腫瘤的生長。因此，在治療劑量的編碼CRT或NCRT的DNA后，對傷口愈合抑制的關(guān)注可能是最小的，不應(yīng)抑制編碼CRT或NCRT的抗血管生成DNA疫苗的臨床解釋。

　　[1] Characterization of DNA vaccines encoding the domains of calreticulin for their ability to elicit tumor-specific immunity and antiangiogenesis[J]. Vaccine, 2005, 23(29):3864-3874.